Eucast dokumenty

Vyšetření antibiotické citlivosti bakterií

Citlivost k antibiotikům lze vyšetřit fenotypovými nebo genotypovými metodami. Základem fenotypových metod je minimální inhibiční koncentrace (MIC). Klinické breakpointy MIC určují, zda vyšetřovaná bakterie je citlivá, intermediárně rezistentní nebo rezistentní k testovanému antibiotiku. Ostatní metody by měly být kalibrovány na referenční metodu MIC.

Postup při zavádění breakpointů EUCAST do vyšetřování citlivosti
Příprava půd EUCAST
Disková difuzní metodologie EUCAST
Kontrola kvality EUCAST
Stanovení MIC u nenáročných a náročných bakterií

Návod usnadňuje zavedení vyšetřování citlivosti EUCAST. Tento návod, který vyvinulo a vyzkoušelo několik laboratoří, bude pomáhat klinickým laboratořím při zavádění diskové difuzní metody.

Postup při závádění metod pro vyšetření citlivosti EUCAST

Základem pro vyšetření antibiotické citlivosti EUCAST je MH agar a MH bujon, pro nenáročné bakterie bez suplementů, a obohacený suplementy pro náročné bakterie (streptokoky, Haemophilus influenzae, Campylobacter a další). Obohacené pevné půdy se označují jako MH-F agar, obohacený bujón jako MH-F bujon.

Příprava ploten a bujonu pro vyšetření citlivosti (verze 7.0 platná od 1. ledna 2022)

Disková difuzní metoda EUCAST je založena na používání půd MH a disků dobré kvality. Je kalibrována podle klinických breakpointů EUCAST získaných stanovením MIC bujónovou mikrodilucí. Aktualizace se pravidelně zveřejňují.

Aktualizace 2023, 2024, česky:

Příručka EUCAST Disková difuzní metoda, v 12, 2024

Prezentace EUCAST Disková difuzní metoda – Prezentace, v 12, 2024

Návod k odečítání EUCAST Disková difuzní metoda, v 10, 2023

Anaerobní bakterie – disková difuzní metoda pro anaerobní bakterie – Příručka v 2,0, 2023

Anaerobní bakterie -disková difuzní metoda – Návod k odečítání v 2,0, 2023

Viz také EUCAST instruction videos

Videa s českými titulky na Youtube

Aktuální tabulky s rozmezím MIC a průměrů zón kontrolních kmenů. Změny mezi starou a novou verzí jsou popsány v úvodu, viz Tabulky pro kontrolu kvality EUCAST.

Tabulky pro kontrolu kvality EUCAST v 13.1 (v angličtině, zahrnují kontrolu kvality i pro anaerobní bakterie)

Doporučení EUCAST pro stanovení MIC u nenáročných bakterií jsou plně v souladu s doporučeními Mezinárodní organizace pro standardizaci ( ISO ). https://www.eucast.org/publications_and_documents/external_documents/

Pro náročné bakterie (streptokoky včetně S. pneumoniae, H. influenzae, Moraxella catharrhalis, Listeria monocytogenes, Pasteurella spp., Kingella kingae, Aerococcus spp., Campylobacter spp. a další) doporučuje EUCAST stejnou metodiku, avšak s použitím půdy MH-F (MH bujón s lýzovanou koňskou krví a beta-NAD), viz soubor EUCAST o přípravě půd.

Bujónová mikrodiluce – návod k odečítání EUCAST – verze 4.0 (leden 2022)

Existuje řada komerčně dostupných alternativních metod stanovení MIC, jako jsou komerční mikrodiluční metody, gradientní testy, poloautomatizovaná zařízení atd. Odpovědností výrobců je zaručit přesnost jejich systémů, uživatel je zodpovědný za kontrolu kvality výsledků získaných s těmito systémy. Uživatelé jsou upozorněni na stránku EUCAST Warnings page, kde jsou některé z těchto produktů kritizovány.